
糖水偏愛實驗(sucrose preference test,SPT)是評價快感缺失的經典行為學檢測實驗,其原理是利用啮齒類動物對甜味的偏好而策劃的一種檢測方法,動物禁食一段時間後,同時給予白水和低濃度蔗糖水,以動物對蔗糖水的偏嗜度(糖水偏愛指數)為指標檢測去判斷動物是否出現快感缺失這一抑郁癥狀。1981年,Katz等首次在抑郁大鼠造模過程中發現,應激後的大鼠蔗糖和糖精水的消耗減少達50%,並進一步發現三環類抗抑郁藥丙咪嗪可顯著增加模型組大鼠糖水的消耗量。目前該實驗多用於檢測慢性不可預知應激後的快感缺失行為。
✦實驗設備✦
賽昂斯SA226型糖水偏好實驗系統,采用微量註射泵自動補水技藝,可以準確測量大小鼠飲水量、飲食時間、飲水次數。每個水嘴前有位置傳感器,只有當大小鼠進入飲水區域,缺少的水才是大小鼠真正喝掉的;大小鼠不在飲水區域,因自然揮發掉的水或者震動滴下的水都被軟件自動去除。
「商品特點」
1、軟件幫助“一鍵換瓶”性能;
2、飲水檢測模塊化策劃,方便位置交換;
3、采用微量註射泵精準補水,精度0.01ml;
4、高通量,最大幫助200通道同時試驗;
5、幫助長時間試驗,幫助試驗中途換水;
6、最大程度還原飼養籠環境,減少應激反應;
7、軟件自動過濾液體揮發對試驗數據的幹擾;
8、飲水事件可通過TTL信號同步到第三方設備;
9、飲水時間精度0.01s,飲水量精度0.001ml;
10、每個籠盒並聯到主機,任一通道故障不影響其他通道正常試驗;
11、試驗指標:單次飲水量、總飲水量、單次飲水時間、總飲水時間、飲水次數等。
✦實驗流程✦
• 前期準備:選擇成年雄性C57BL/6小鼠(8-10周齡),單籠飼養適應實驗室環境1周。測試金屬嘴導電性,確保舔水信號靈敏度(誤觸率<1%);預實驗驗證糖水與普通水瓶舔水次數基線(健康小鼠糖水偏好率>65%)。
• 適應期:動物需適應實驗環境及雙水瓶裝置,通常12-24小時。
• 基線測試:記錄正常狀態下糖水偏好指數(糖水消耗量/總液體消耗量×100%)。
• 幹預處理:如藥品註射、慢性應激等,隨後再次測量偏好指數。
• 最終測試:實驗組腹腔註射氟西汀(10 mg/kg),對照組註射生理鹽水;給藥後禁食4小時(僅供應飲水);供應糖水與普通水瓶,連續記錄24小時舔水次數;分析時段特異性數據(如給藥後0-4小時 vs 4-24小時)。
評價指標:
糖水偏愛指數=蔗糖水飲用量/(蔗糖水飲用量+飲用水飲用量)x100%。
✦註意事項✦
(1)糖水偏愛實驗對環境變化非常敏感,是影響實驗成功與否的關鍵因素,檢測應在獨立房間進行,保持環境安靜,且實驗期間保持溫度濕度適宜。
(2)基線測試階段,對於多次訓練但基線仍不穩定,或飲水量過多或過少的動物需剔除。
✦討論和小結✦
糖水偏愛實驗可以評價抑郁模型動物是否出現人類抑郁癥核心癥狀--快感缺失,具有較高的可信度。糖水偏愛實驗用於抑郁行為評價的方法小結如下:
1.飲水量的準確獲取
關鍵因素是瓶嘴不自動向外滴水,只有動物舔舐時才出水,自然揮發掉的水或者震動滴下的水都要扣除。
2.實驗模式
糖水偏愛實驗分為蔗糖飲水訓練、基線測定、根據基線分組、抑郁模型復製和藥物處理蔗糖飲水測試幾部分。該實驗在慢性應激模型中應用最廣泛,一般應激4~5周,型動物水偏愛指數出現顯著降低。此外,該實驗為抗抑郁藥物起效速率研究的最主要行為學檢測方法,因此在藥物處理階段可進行周期性檢測。
3.判斷指標
糖水偏愛指數為主要的評價指標,抑郁行為判斷標準:糖水偏愛指數低於0.4或者與對照組相比有顯著性減低。空白對照組大鼠的糖水偏愛指數大於80%,空白對照組小鼠的糖水偏愛指數大於70%。
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